TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA

TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA

En un estudio sobre el efecto del factor antihemofílico en las pruebas de coagulación de una fase, Longdell, Wagner y Brinkhous(1953) demostraron que había 2 tipos de actividad tromboplastínica y confirmaron la observación de Mills(1926) de que los preparados de cefalina cruda no coagulan el plasma hemofílico tan pronto como el plasma normal.

Cuando las tromboplastinas hísticas activadas fueron diluidas o fraccionadas, tenían estos preparados una actividad semejante a la de la cefalina cruda. Basándose en estos hallazgos, los preparados de tromboplastina pueden describirse como completos o parciales. Las tromboplastinas completas son capaces de producir una coagulación tan rápida en el plasma hemofílico como en el normal, mientras que con la parcial el plasma hemofílico coagula menos rápidamente que el plasma normal.

FUNDAMENTO

El tiempo de tromboplastina parcial mide la actividad intrínseca de la coagulación del plasma. El tiempo requerido para que el plasma recalcificado coagule después de la incubación con fosfolípidos plaquetarios(cefalina) y un activador(caolín) del factor de contacto, es una medida de intensidad con la cual se forma la trombina a través de la vía intrínseca de la coagulación.

Esta prueba mide los factores viii, ix, xi, xii, ii, v, x y la conversión de fibrinógeno a fibrina.

OBJETIVOS

Analizar el mecanismo de acción de la tromboplastina pacrial dentro del fenómeno de la coagulación.

Familiarizarse con las precauciones que requieren esta técnica y todas las de coagulación.

MATERIAL

   Ø  CaCl .025M

   Ø  Plasma problema citratado.

   Ø  Plsma normal citratado.

   Ø  Sustituto de plaquetas(tromboplastina parcial) activada.

   Ø  3 tubos de ensayo.

   Ø  Pipeta serológica de 0.1ml

   Ø  P. s. de 1ml.  

   Ø  Pipeta pasteur con bulbo.

   Ø  Gradilla

   Ø  Equipo vacutainer.

   Ø  Torundas y torniquete. 

   Ø  Cronómetro.

Técnica:

  1)      El plasma deberá separarse inmediatamente del paquete de eritrocitos y ser colocado en refrigeración.

   2)      Se añade 0.1ml de tromboplastina parcial líquida activada a un tubo de ensayo y se incuba a 37°C durante dos mins.

   3)      Transcurrido los dos minutos, agregar 0.1ml de plasma, se mezclan perfectamente e incubar a 37°C durante dos minutos. 

   4)      Agregar 0.1ml del reactivo de CaCl2 0.02M(que se encuentra también a la misma temperatura) y simultáneamente se pone en marcha el cronómetro. Incubar, a los 20 segs. Observar cuidadosamente el tubo de la prueba, haciendo resbalar el contenido por la pared, hasta la aparición de los primeros hilos de fibrina. En este momento detener el funcionamiento del cronómetro. L observación debe hacerse con mucha rapidez metiendo y sacando el tubo del baño de agua.

   5)      Se inclina el tubo buscando el punto final o se puede usar el asa de platino. El punto final consiste en la parición de los filamentos de fibrina. 

   6)      Se repite la operación con el plasma problema.

   7)      Es aconsejable realizar las pruebas por duplicado.

RESULTADOS

La prolongación normla indica deficiencias intrínsecas de un factor o presencia de un inhibidor. Sólo el factor vii no está incluido en el tiempo de tromboplastina parcial. Detecta deficiencias importantes de los factores vii, ix, xi, xii o presencia de inhibidores(anticoagulantes circulantes) como la heparina, anticuerpos dirigidos contra el factor vii o ix.

VALORES DE REFERENCIA

Tiempo de tromboplastina parcial :+-3 segundos.