FROTIS SANGUINEO Y TINCIONES

FROTIS Y TINCIONES

El examen cuidadoso del frotis sanguíneo proporciona más información que cualquier otro parámetro de laboratorio, sin embargo, la interpretación solo se adquiere con la práctica y estudio constante, es importante resaltar el hecho de que la utilidad de esta prueba se ve corelacionada con una orientación clínica justificada por parte del médico.

Por medio del examen del frotis sanguíneo periférico teñido con colorantes, policromatófilos, es posible detectar alteraciones morfológicas en los hematíes como:

Macrocitosis, microcitosis, anisocromia, policromatofilia, anillos de Cabot, cuerpos de Howell y otras variaciones en la forma, gracias a lo cual es posible establecer un diagnostico presuntivo de algunos tipos de anemia.

Así mismo se puede realizar la identificación de los leucocitos en base a afinidades tintoríales o morfológicas y gracias a esto se pueden detectar trastornos cuantitativos y mieloproliferativos y en ocasiones alteraciones cualitativas de los leucocitos; la observación de las plaquetas proporcionan un valor semicuantitativo de las mismas.

FUNDAMENTO

Los colorantes policromatófilos son mezclas de compuestos básicos de azul de metileno y de la eosina, estas mezclas presentan afinidad por las estructuras celulares dependiendo de su carácter acido o básico así, los componentes básicos se tiñen con el colorante básico(basófilos) y viceversa eosinófilos, otras estructuras se tiñen con ambos colorantes neutrófilos.

OBJETIVOS

Identificar los diversos tipos celulares en el frotis de sangre periférica en base a sus características morfológicas y tintoríales.

MATERIALES

   Ø  Portaobjetos

   Ø  cubreobjetos

   Ø  Cámara de tinción

   Ø  Piseta 

   Ø  Vaso de precipitado de 250ml

MATERIAL BIOLOGICO

Sangre capilar o venosa con anticoagulante (EDTA)

EQUIPO

Microscopio

Contador de células

REACTIVOS

   Ø  Metanol

   Ø  Colorante de Wright

   Ø  Colorante de Giemsa 

   Ø  Solución amortiguadora de fosfatos pH 7.2

   Ø  Xilol

   Ø  Bálsamo de Canadá

   Ø  Mezcla alcohol-acetona

   Ø  Aceite de inmersión

TECNICA

Preparación del frotis de sangre periférica(método de portaobjetos);

   1)      se coloca una gota de sangre, en uno de los extremos de un portaobjetos, se sujeta colocando los dedos pular e índice en extremos opuestos, con un segundo portaobjetos se toca la gota de sangre y por capilaridad se difunde; en un angulo de 45° de desliza raóda y firmemente en dirección opuesta.

  2)      Deslizar suavemente a velocidad moderada el porta objeto sobre otro en sentido longitudinal, hasta que la gota de sangre quede bien extendida sobre la superficie del primer porta objeto. El grosor de del frotis sanguíneo puede variar según sea el angulo que formen entre si ambos portaobjetos. Asi, si es superior a 45°, la extensión obtenida será gruesta y corta, y si es inferior será larga y fina. El secado del frotis es a temperatura ambiente y en posición horizontal.