CUENTA DE PLAQUETAS

CUENTA DE PLAQUETAS

Las plaquetas se originan en la medula ósea a partir del megacariocito, son redondas y ovaladas, y miden de 1 a 3 micras de diámetro. Tienen una vida media de 8 a 11 días, desempeñan una función crítica de la hemostasia.

FUNDAMENTO

En una dilución con citrato de sodio adicionado de azul de cresil brillante, las plaquetas se observan al microscopio como células en un movimiento browniano. Las plaquetas se cuentan en una cámara de Neubauer utilizando también microscopia de contraste de fases después de que los eritrocitos han sedimentado en solución con oxalato de amonio al 1%.

MATERIAL

 Ø  Tubos de ensayo de 13x10mm

 Ø  Pipeta de Thoma para glóbulos rojos

 Ø  Cámara de Neubauer

 Ø  Caja Petri

 Ø  Gradilla para tubos

 Ø  Boquilla

 Ø  Papel sanitario

MATERIAL BIOLOGICO

Sangre venosa o capilar con anticoagulante (EDTA al 10%)

EQUIPO

 Ø  Microscopio

 Ø  Agitador de pipetas de Thoma

REACTIVOS

 Ø  Solución EDTA al 10%

 Ø  Liquido diluyente de plaquetas

 Ø  Solución de oxalato de amonio al 1%

  

TECNICA

   1)      Cargar con la muestra de sangre la pipeta de Thoma para glóbulos rojos hasta la marca de 1.0

   2)      Limpiar cuidadosamente la sangre adherida al exterior de la pipeta

   3)      Completar el volumen hasta la marca de 101 con el líquido diluyente de plaquetas o con oxalato de amonio al 1%(según el método a emplear) dilución 1:100

   4)      Mezclar el diluyente y la sangre por agitación durante 3 a 5 minutos.

   5)      Descartar las primeras 4 o 5 gotas de la pipeta y cargar la cámara Neubauer.

   6)      Preparar una caja de Petri con papel filtro humedecido y sobre este unos soportes de madera para dejar reposar la cámara durante 15 minutos.

   7)      Al finalizar este periodo, realizar la cuenta de las plaquetas con el objetivo de 40x y el ocular de 10x. debe trabajarse con una buena iluminaciones el microscopio para evita confundir las plaquetas con levaduras, colorante precipitado o artefactos. En la cámara las plaquetas aparecen como cuerpos retractiles ovales o elongados.

   8)      Contar todos los cuadros del cuadro central (para glóbulos rojos) que tiene una superficie de 1mm^2.

NOTA: esta determinación debe hacerse rápidamente para evitar que las plaquetas que las plaquetas se aglomeran.

CALCULOS

# de plaquetas/mm^3 = Nx 10 x 100

                                          = N x1000

Dónde:

N    = número de plaquetas contadas

10  = corrección por altura de cámara

100 = factor de dilución

VALORES DE REFERENCIA

150 000 – 400 000 plaquetas/mm^3                 150 – 400 x10