PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

(prueba de la anti-globulina humana)

Objetivo
Se usa en banco de sangre para detectar la presencia “in vivo” (dentro del cuerpo) de eritrocitos sensibilizados a anticuerpos atípicos o irregulares, comúnmente IgG.
Esta prueba ayuda a diagnosticar alguna de los siguientes padecimientos:
-Enfermedad hemolítica del recién nacido
-Anemias hemolíticas del tipo autoinmune
-Reacciones post-transfusionales
-Detección de anticuerpos inducidos por medicamentos

Material
-Dos tubos de ensayo 10 x 75 mm
-Muestra sanguínea a revisar
- gradilla
-Pipeta Pasteur
-Suero de anti-globulina humana (Coombs)
-Control de Coombs

Procedimiento
1.- De la sangre del paciente se debe separar los eritrocitos del suero, en caso de que se haya extraído sin anticoagulante. Una vez extraídos lavarlos con solución salina 0.85% tres veces. Los lavaos deben efectuarse a 3,400rpm por 15 seg. O 1,000rpm por 1min.
2.- Una vez lavados, preparar una suspensión al 5% con solución salina.
3.- Se colocara en otro tubo una gota de la dilución de eritrocitos con dos gotas de suero de Coombs. Mezclar bien y centrifugar 30 seg. a 3,400rpm.
4.- Separar el botón de eritrocitos y observar resultados.

Interpretación de resultados
-Negativa: No se presenta aglutinación
-Positiva: Aglutinación presente

En caso de un resultado negativo procede lo siguiente:
Agregar al tubo una gota de control de Coombs (contiene eritrocitos humanos, reactivos, lo que permite verificar el resultado y comprobar que no es causado por contaminación).
Una vez agregado se centrifugara nuevamente para su posterior lectura.
La segunda lectura, deberá ser positiva confirmando la negatividad de la primera.